PCR en cardiopatía isquémica

 Tema: Nanopartículas derivadas de la válvula aortica, sin evidencias de vida 
Objetivo: 

• El objetivo del trabajo es clarificar si las nanopartículas calcificantes son entes vivos basándonos en si tienen o no actividad metabólica.
•  Investigar el posible origen biológico de las CNP analizando los perfiles metabólicos de ¹H-RMN de medios de cultivo de CNP.

Muestra: 

• cultivo de 6 valvulas aórticas
• extraccion de nanoparticulas 

Tipo de ácido nucleico:

• 16sRNA
• ADN

Gen a amplificar:

• región hipervariable V4 del gen del 16SrRNA bacteriano, Las regiones V4 (290 pb) se amplificaron usando cebadores universales situados en secuencias de la región V4 con una alta conservación: V4 F (5’-GCC AGC AGC CGC GGT AA-3’) y V4R_ 805_19 (5’-GAC TAC CAG GGT ATC TAA T-3’).

Tipo de PCR

• PCR Master Mix

Pasos de  PCR:

• Ampliación: a 50° durante 2 minutos.
• 10min a 95°C 
•  40 ciclos de 15 s a 95°C y 1min a 60°C.

Referencias:

http://appswl.elsevier.es/watermark/ctl_servlet?_f=10&pident_articulo=90150854&pident_usuario=0&pcontactid=&pident_revista=25&ty=167&accion=L&origen=cardio&web=www.revespcardiol.org&lan=es&fichero=25v65n09a90150854pdf001.pdf&anuncioPdf=ERROR_publi_pdf